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浮遊菌采樣(yang)器的測(ce)試(shi)流程(cheng),原來可以(yi)這麽(me)簡(jian)潔
更(geng)新時(shi)間:2022-01-03
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浮(fu)遊(you)菌采樣(yang)器用(yong)於制藥(yao)GMP廠(chang)房(fang)、乳制品廠(chang)房(fang)、、生(sheng)物潔凈(jing)、發(fa)酵工(gong)業等(deng)潔凈(jing)室(shi)和(he)無(wu)菌環(huan)境(jing)中的空(kong)氣微生(sheng)物檢(jian)測(ce)以(yi)及有(you)關研究(jiu)教(jiao)學部門作空(kong)氣微生(sheng)物的采樣(yang)研究(jiu)。
浮遊(you)菌采樣(yang)器壹(yi)種(zhong)多孔(kong)吸(xi)入式(shi)塵菌采樣(yang)器。它(ta)根據(ju)顆粒撞(zhuang)擊(ji)原理(li)和等(deng)速(su)采樣(yang)理(li)論設計,采樣(yang)直接(jie),采樣(yang)口(kou)風速(su)與潔凈(jing)室(shi)內(nei)風速基(ji)本壹(yi)致(zhi),能更(geng)準(zhun)確(que)地反映(ying)潔凈(jing)室(shi)內(nei)的微生(sheng)物濃(nong)度(du)。采樣(yang)時(shi),帶(dai)塵菌空(kong)氣高(gao)速通過微孔(kong),被(bei)撞(zhuang)擊(ji)在(zai)培(pei)養(yang)皿內的瓊脂表面;這些(xie)活體微生(sheng)物在(zai)培(pei)養(yang)過程(cheng)中,發(fa)生(sheng)動態(tai)再(zai)水(shui)化過程(cheng),高(gao)速生(sheng)長(chang),從而更(geng)快得出(chu)結果(guo)。
浮(fu)遊(you)菌采樣(yang)器的測(ce)試(shi)流程(cheng):
測(ce)試(shi)方(fang)法
4.1 方(fang)法提要
本方法(fa)采用(yong)計數(shu)濃(nong)度(du)法,即(ji)通過收(shou)集懸(xuan)遊在(zai)空(kong)氣中的性粒子(zi)於專(zhuan)門的培(pei)養(yang)基,經(jing)若幹時(shi)間,在(zai)適(shi)宜(yi)的生(sheng)長(chang)條件下(xia)讓其繁(fan)殖(zhi)到可見(jian)的菌落(luo)進(jin)行計(ji)數(shu),從(cong)而判定(ding)潔凈(jing)環(huan)境(jing)內單位體積空(kong)氣中的活(huo)微數(shu),以(yi)此(ci)來評定(ding)潔凈(jing)室(shi)(區(qu))的潔凈(jing)度(du)。
4.2 所用(yong)的儀(yi)器(qi)、設備(bei)和培(pei)養(yang)基
a)浮(fu)遊(you)菌采樣(yang)器;
b)真(zhen)空(kong)抽氣泵;
c)培(pei)養(yang)皿;
d)培(pei)養(yang)基;
e)恒(heng)溫(wen)培(pei)養(yang)箱。
4.3 浮(fu)遊(you)菌采樣(yang)器
浮(fu)遊(you)菌采樣(yang)器宜(yi)采用(yong)撞擊(ji)法(fa)機(ji)理(li)的采樣(yang)器,壹(yi)般(ban)采用(yong)狹縫(feng)式(shi)采樣(yang)器或離心式(shi)采樣(yang)器。
4.3.1 采用(yong)的浮(fu)遊(you)菌采樣(yang)器須(xu)要(yao)有(you)流量(liang)計(ji)和定(ding)時(shi)器。
4.3.2 狹縫(feng)式(shi)采樣(yang)器的原理(li)
狹縫(feng)式(shi)采樣(yang)器由附加(jia)的真(zhen)空(kong)抽氣泵抽氣,通過采樣(yang)器的縫(feng)隙(xi)式(shi)平板(ban),將(jiang)采集的空(kong)氣噴射並撞(zhuang)擊(ji)到緩慢旋轉的平板(ban)培(pei)養(yang)基表面上(shang),附著的活(huo)微粒子(zi)經(jing)培(pei)養(yang)後形(xing)成(cheng)菌落(luo),予以(yi)計數(shu)。
4.3.3 離心式(shi)采樣(yang)器的原理(li)
離心式(shi)采樣(yang)器由於內部風機(ji)的高(gao)速旋轉,氣流從(cong)采樣(yang)器前部吸(xi)入從(cong)後部流出(chu),在(zai)離心力(li)的作(zuo)用(yong)下,空(kong)氣中的活(huo)微粒子(zi)有(you)足(zu)夠(gou)的時(shi)間撞(zhuang)擊到專(zhuan)用(yong)的固(gu)形(xing)培(pei)養(yang)條上(shang),經(jing)培(pei)養(yang)後形(xing)成(cheng)菌落(luo),予以(yi)計數(shu)。
4.3.4 狹縫(feng)式(shi)采樣(yang)器的使(shi)用(yong)要點(dian)
應嚴格按(an)儀(yi)器(qi)說明書(shu)的要(yao)求(qiu)進(jin)行操(cao)作(zuo)。
4.3.4.1 校(xiao)驗(yan)
采樣(yang)器須(xu)按(an)儀(yi)器(qi)的檢(jian)定(ding)周期,定(ding)期(qi)對儀(yi)器(qi)作檢定(ding),以(yi)保(bao)證測(ce)試(shi)數(shu)據(ju)的可靠性。校驗(yan)的項目有(you):定(ding)時(shi)器、轉盤(pan)轉速(su)、流量(liang)計(ji)。
4.3.2 每(mei)次(ci)測(ce)試(shi)前應按說明書(shu)上(shang)的規定(ding),先(xian)接(jie)通(tong)電源(yuan),啟動真(zhen)空(kong)抽氣泵,然(ran)後調(tiao)節流量(liang)計(ji)及定(ding)時(shi)器。
4.3.4.3空(kong)氣采樣(yang)量(liang)根據(ju)需要選定(ding)。已(yi)知(zhi)采樣(yang)器的流量(liang)(L/min),設定(ding)采樣(yang)時(shi)間(min),兩者(zhe)相乘即采樣(yang)量(liang)(L)。
4.3.4.4 註(zhu)意事(shi)項
4.3.4.4.1 采樣(yang)口(kou)須用(yong)便於消毒(du)及(ji)化學性能穩(wen)定(ding)的材(cai)料(liao)制造(zao)。
4.3.4.4.2 采樣(yang)管嚴(yan)禁(jin)滲漏(lou),內(nei)壁應光滑(hua)。
4.3.4.4.3 采樣(yang)管的長(chang)度(du)應根據(ju)測(ce)點(dian)的高(gao)度(du)定(ding),盡(jin)量(liang)減(jian)少彎(wan)曲(qu)。
4.4 真(zhen)空(kong)抽氣泵
4.4.1 真(zhen)空(kong)抽氣泵的排(pai)氣量(liang)應與采樣(yang)器匹(pi)配(pei)。
4.4.2 宜(yi)采用(yong)無(wu)油(you)真(zhen)空(kong)抽氣泵,必(bi)要時(shi)可在(zai)非氣口(kou)安裝(zhuang)氣體過濾(lv)器。
4.4.3 真(zhen)空(kong)抽氣泵安裝(zhuang)的位置(zhi)須適(shi)當,壹(yi)般(ban)裝(zhuang)在(zai)采樣(yang)器下(xia)面(mian)。
4.5 培(pei)養(yang)皿
4.5.1 狹縫(feng)式(shi)采樣(yang)器壹(yi)般(ban)采用(yong)?150mm×15mm、?90mm×15mm、?65mm×15mm三種(zhong)規格的硼矽(gui)酸(suan)玻璃培(pei)養(yang)皿。可根據(ju)所選用(yong)采樣(yang)器選擇合適(shi)的培(pei)養(yang)皿。
4.5.2 離心式(shi)采樣(yang)器采用(yong)專(zhuan)用(yong)的固(gu)形(xing)培(pei)養(yang)條。
4.6 培(pei)養(yang)基
普(pu)通(tong)肉湯(tang)瓊脂培(pei)養(yang)基或其他(ta)藥(yao)典(dian)認可的培(pei)養(yang)基。其配(pei)制方法見附錄A(標準(zhun)的附(fu)錄(lu))。
浮遊菌采樣(yang)器
4.7 恒(heng)溫(wen)培(pei)養(yang)箱
須(xu)定(ding)期(qi)對培(pei)養(yang)箱的溫(wen)度(du)計進(jin)行檢(jian)定(ding)。
4.8 測(ce)試(shi)步驟(zhou)
4.8.1 測(ce)試(shi)前儀(yi)器(qi)、培(pei)養(yang)皿表面須(xu)嚴格(ge)消毒(du)。
4.8.1.1 采樣(yang)器進(jin)入被(bei)測(ce)房間(jian)前先(xian)用(yong)消毒(du)房(fang)間的消毒(du)劑(ji)滅菌,用(yong)於100級(ji)潔凈(jing)室(shi)的采樣(yang)器宜(yi)壹(yi)直(zhi)放在(zai)被測(ce)房間(jian)內。
4.8.1.2 用(yong)消毒(du)劑(ji)擦(ca)凈(jing)培(pei)養(yang)皿的外(wai)表面。
4.8.1.3采樣(yang)前,先(xian)用(yong)消毒(du)劑(ji)消毒(du)采樣(yang)器的頂蓋、轉盤(pan)以(yi)及罩(zhao)子的內(nei)外(wai)面,采樣(yang)結束(shu),再(zai)用(yong)消毒(du)劑(ji)輕(qing)輕(qing)噴射(she)罩(zhao)子(zi)的內(nei)壁和(he)轉盤(pan)。
4.8.1.4采樣(yang)口(kou)及采樣(yang)管,使(shi)用(yong)前須高(gao)溫滅菌。如用(yong)消毒(du)劑(ji)對采樣(yang)管的外(wai)壁及(ji)內壁進(jin)行消毒(du)時(shi),應將(jiang)管中的殘(can)留液倒(dao)掉(diao)並(bing)晾(liang)幹。
4.8.1.5 采樣(yang)者應穿(chuan)戴與(yu)被(bei)測(ce)潔凈(jing)區(qu)域(yu)相應的工(gong)作(zuo)服(fu),在(zai)轉盤(pan)上(shang)放入或調(tiao)換培(pei)養(yang)皿前,雙手用(yong)消毒(du)劑(ji)消毒(du)。
4.8.2 狹縫(feng)式(shi)采樣(yang)器的采樣(yang)程序
4.8.2.1儀(yi)器(qi)經(jing)消毒(du)後先(xian)不(bu)放入培(pei)養(yang)皿,開(kai)動真(zhen)空(kong)泵抽氣,使儀(yi)器(qi)中的殘(can)余(yu)消毒(du)劑(ji)蒸發(fa),時(shi)間不(bu)少於5min,並調(tiao)好流量(liang)、轉盤(pan)轉速(su)。
4.8.2.2 關閉(bi)真(zhen)空(kong)泵,放入培(pei)養(yang)皿,蓋上蓋(gai)子(zi)後調(tiao)節采樣(yang)器縫(feng)隙(xi)高(gao)度(du)。
4.8.2.3 置(zhi)采樣(yang)口(kou)於采樣(yang)點(dian)後,依次(ci)開(kai)啟采樣(yang)器、真(zhen)空(kong)泵,轉動定(ding)時(shi)器,根據(ju)采樣(yang)量(liang)設定(ding)采樣(yang)時(shi)間。
4.8.3 培(pei)養(yang)
4.8.3.1 全(quan)部采樣(yang)結束(shu)後,將(jiang)培(pei)養(yang)皿倒置(zhi)於恒溫(wen)培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)。
4.8.3.2 在(zai)30℃~35℃培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang),時(shi)間不(bu)少於48h。
4.8.3.3 每(mei)批(pi)培(pei)養(yang)基應有對照試(shi)驗(yan),檢驗(yan)培(pei)養(yang)基本身是(shi)否汙染。可每(mei)批(pi)選定(ding)3只(zhi)培(pei)養(yang)皿作對照培(pei)養(yang)。
4.8.4 菌落(luo)計數(shu)
4.8.4.1 用(yong)肉眼直接(jie)計(ji)數(shu)、標記或在(zai)菌落(luo)計數(shu)器(qi)上(shang)點(dian)計(ji),然(ran)後用(yong)5~10倍放(fang)大(da)鏡檢(jian)查(zha),有否遺漏(lou)。
4.8.4.2 若平板(ban)上有(you)2個或2個以(yi)上的菌落(luo)重(zhong)疊(die),可分辨(bian)時(shi)仍以(yi)2個或2個以(yi)上的菌落(luo)計數(shu)。
4.8.5 註(zhu)意事(shi)項
4.8.5.1 使用(yong)前仔細檢(jian)查(zha)每(mei)個培(pei)養(yang)皿的質(zhi)量(liang),培(pei)養(yang)基及(ji)培(pei)養(yang)皿有變質(zhi)、破(po)損(sun)或汙染的不(bu)能使(shi)用(yong)。
4.8.5.2 采取壹(yi)切(qie)措(cuo)施(shi)防(fang)止(zhi)采樣(yang)管的汙染和(he)其他(ta)為(wei)對樣(yang)本的汙染。
4.8.5.3 對培(pei)養(yang)基、培(pei)養(yang)條件及(ji)其他(ta)參(can)數(shu)作(zuo)詳細的記(ji)錄(lu)。
4.8.5.4由於細菌種類(lei)繁(fan)多,差別(bie)甚(shen)大,計(ji)數(shu)時(shi)壹(yi)般(ban)用(yong)透(tou)射光(guang)於培(pei)養(yang)皿背面或正(zheng)面(mian)仔細觀(guan)察(cha),不(bu)要漏(lou)計(ji)培(pei)養(yang)皿邊緣(yuan)生(sheng)長(chang)的菌落(luo),並須(xu)註(zhu)意細(xi)菌菌落(luo)或培(pei)養(yang)基沈澱物的區(qu)別(bie),必(bi)要時(shi)用(yong)顯(xian)微鏡鑒(jian)別(bie)。
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